Teknik Pewarnaan

LancangKuning.com - Dikarenakan sitoplasma mikroba biasanya transparan, perlu untuk menodai mikroorganisme sebelum dapat dilihat dengan mikroskop cahaya. Dalam beberapa kasus, pewarnaan tidak diperlukan, misalnya ketika mikroorganisme sangat besar atau ketika motilitas akan dipelajari, dan setetes mikroorganisme dapat ditempatkan langsung pada slide dan diamati.

Persiapan seperti ini disebut wet mount. Dudukan basah juga dapat disiapkan dengan menempatkan setetes kultur pada slip penutup (penutup kaca untuk slide) dan kemudian membalikkannya pada slide berlubang yang keluar. Prosedur ini disebut drop gantung. Dalam persiapan untuk pewarnaan, sampel kecil mikroorganisme ditempatkan pada slide dan diizinkan untuk mengeringkan udara. Apusan difiksasi dengan memanaskannya dengan cepat di atas nyala api.

Baca juga : Tempat Wisata di Pekanbaru

Memperbaiki panas membunuh organisme, membuatnya menempel pada slide, dan memungkinkan mereka menerima noda. Teknik pewarnaan sederhana. Pewarnaan dapat dilakukan dengan pewarna dasar seperti violet kristal atau biru metilen, pewarna bermuatan positif yang tertarik pada bahan bermuatan negatif dari sitoplasma mikroba. Prosedur seperti itu adalah prosedur pewarnaan sederhana.

Alternatif lain adalah dengan menggunakan pewarna seperti nigrosin atau Kongo merah, asam, pewarna bermuatan negatif. Mereka ditolak oleh sitoplasma bermuatan negatif dan berkumpul di sekitar sel, meninggalkan sel-sel yang bersih dan tidak ternoda. Teknik ini disebut teknik pewarnaan negatif.

Teknik pewarnaan diferensial. Teknik pewarnaan diferensial membedakan dua jenis organisme. Contohnya adalah teknik pewarnaan Gram. Teknik diferensial ini memisahkan bakteri menjadi dua kelompok, bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif. Kristal violet pertama kali diterapkan, diikuti oleh yodium mordan, yang memperbaiki noda (Gambar).

Kemudian slide dicuci dengan alkohol, dan bakteri Gram-positif mempertahankan pewarnaan iodine kristal ungu; Namun, bakteri Gram-negatif kehilangan noda. Bakteri Gram-negatif selanjutnya diwarnai dengan pewarna safranin, counterstain, digunakan berikutnya. Bakteri ini tampak merah di bawah lensa perendaman minyak, sedangkan bakteri Gram-positif muncul biru atau ungu, mencerminkan violet kristal yang tertahan selama langkah pencucian.

Teknik pewarnaan diferensial lainnya adalah teknik tahan asam. Teknik ini membedakan spesies Mycobacterium dari bakteri lain. Panas atau pelarut lipid digunakan untuk membawa noda pertama, carbolfuchsin, ke dalam sel. Kemudian sel-sel dicuci dengan larutan asam-alkohol encer. Spesies Mycobacterium menahan efek asam-alkohol dan mempertahankan noda carbolfuchsin (merah terang). Bakteri lain kehilangan noda dan mengambil noda biru metilen berikutnya (biru).

Baca juga : Prinsip Kerja VSAT

Dengan demikian, bakteri tahan asam tampak merah cerah, sedangkan bakteri tidak cepat asam tampak biru ketika diamati di bawah mikroskop perendaman minyak. Teknik pewarnaan lain berusaha mengidentifikasi berbagai struktur bakteri yang penting. Misalnya, teknik pewarnaan khusus menyoroti flagela bakteri dengan melapisi flagela dengan pewarna atau logam untuk menambah lebarnya. Flagella yang begitu ternoda kemudian bisa diamati.

Teknik pewarnaan khusus digunakan untuk memeriksa spora bakteri. Hijau perunggu digunakan dengan panas untuk memaksa noda ke dalam sel dan memberi mereka warna. Counterstain, safranin, kemudian digunakan untuk memberi warna pada bakteri yang tidak membentuk pori. Pada akhir prosedur, spora berwarna hijau dan sel-sel lain berwarna merah.

Prosedur pewarnaan Gram digunakan untuk membedakan bakteri menjadi dua kelompok.

Teknik pewarnaan diferensial lainnya adalah teknik tahan asam. Teknik ini membedakan spesies Mycobacterium dari bakteri lain. Panas atau pelarut lipid digunakan untuk membawa noda pertama, carbolfuchsin, ke dalam sel. Kemudian sel-sel dicuci dengan larutan asam-alkohol encer. Spesies Mycobacterium menahan efek asam-alkohol dan mempertahankan noda carbolfuchsin (merah terang).

Bakteri lain kehilangan noda dan mengambil noda biru metilen berikutnya (biru). Dengan demikian, bakteri yang tahan asam tampak merah cerah, sedangkan bakteri yang tidak cepat asam tampak biru ketika diamati di bawah mikroskop perendaman minyak.

Teknik pewarnaan lain berusaha mengidentifikasi berbagai struktur bakteri yang penting. Misalnya, teknik pewarnaan khusus menyoroti flagela bakteri dengan melapisi flagela dengan pewarna atau logam untuk menambah lebarnya. Flagella yang begitu ternoda kemudian bisa diamati.

Baca juga : Tempat Wisata di Riau

Teknik pewarnaan khusus digunakan untuk memeriksa spora bakteri. Hijau perunggu digunakan dengan panas untuk memaksa noda ke dalam sel dan memberi mereka warna. Counterstain, safranin, kemudian digunakan untuk memberi warna pada bakteri yang tidak membentuk pori. Pada akhir prosedur, spora berwarna hijau dan sel-sel lain berwarna merah. (Mawarni)